用 途:
供鉴别肠道菌属能否产生氨基酸脱羧酶用(GB/T4789.4-2008和《中华人民共和国药典》2005年版)。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;溴甲酚紫为pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色;在基础培养基加入赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸检测细菌是否产生以上底物的酶。
配方(每升):
蛋白胨 |
5g |
酵母膏粉 |
3g |
葡萄糖 |
1g |
溴甲酚紫 |
0.016g |
最终pH 6.8±0.2
使用方法:
1、 称取本品9g,加入蒸馏水或去离子水或去离子水1 L,分别加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(赖氨酸、精氨酸或鸟氨酸),搅拌加热煮沸至完全溶解后再校正pH。对照培养基不加氨基酸。分装试管,每管2.5mL,液面复盖约3mm高度液体石蜡。
2、 115℃高压灭菌10min,待冷却后备用。
3、 取待检菌的新鲜纯培养物,分别接种在含有各种氨基酸的培养基内(仔细地通过培养基内的液体石腊层接种在培养基内)和不含氨基酸的对照管内,置36±1℃培养18—24h后作初次观察,必要时可延长至48h。
4、 氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基呈紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。
质量控制:
下列菌株接种后36±1℃培养18—24h,结果如下:
菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
培养特征 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B)50115 |
良好 |
培养基呈紫色 |
普通变形杆菌 |
CMCC(B)49027 |
良好 |
培养基呈黄色 |
注意事项:
1、 接种前须将各种培养基及对照管做好标记,以免混淆,造成错误判断。
2、 经培养后对照管必须为黄色,否则氨基酸脱羧酶试验无效。
3、 判断结果时,应与未接种的培养基进行比较,试验管出现任何紫色的痕迹都可判定为阳性结果,培养时间一般不应超过4d,若时间过长,蛋白胨中其他氨基酸可被分解产碱,出现假阳性。
4、 有时培养时间过长指示剂被破坏,颜色可能不清楚或消失,可在试管内再加溴甲酚紫来证实。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
参考文献:
1.GB/T4789.4-2008中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验沙门氏菌检验
2.《中华人民共和国药典》2005年版,附录XI J微生物限度检查。
资料提供:广东环凯微生物科技有限公司