用 途:
用于大肠菌群平板计数的快速检测 (GB/T4789.32-2002)。
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,分解培养基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使茜素游离,并与培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色(或红色)的螯合物,使菌落呈现相应的颜色。
配方(每升):
胰蛋白胨 |
20g |
氯化钠 |
5g |
磷酸氢二钾 |
2.75g |
磷酸二氢钾 |
2.75g |
月桂基硫酸钠 |
0.1g |
Aliz-gal(纯度不低于97%) |
0.05g |
异丙基硫代半乳糖苷 |
0.03g |
硫酸铝钾 |
0.5g |
柠檬酸铁铵 |
0.5g |
琼脂 |
15g |
最终pH7.1±0.2
使用方法:
1、称取本品47.1g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,116℃高压灭菌10min,备用。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基。
3、37±1℃培养18—24h。
4、观察结果。
质量控制:
质控菌株接种后于37±1℃培养24h结果如下:
菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
培养特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
良好 |
紫红色 |
产气肠杆菌 |
CMCC(B)45103 |
良好 |
紫红色 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B)50115 |
良好 |
无色 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
受抑制 |
----- |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
参考文献:
1.GB/T 4789 .32—2002食品卫生微生物学检验标准大肠菌群快速检测。
资料提供:广东环凯微生物科技有限公司