用 途:
用于多管发酵法快速检测大肠菌群(GB/T4789.32-2002)。
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,分解液体培养基中的酶底物4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷MUGal,使4-甲基伞形酮游离,在波长366nm紫外灯照射下呈现蓝色荧光。
配方(每升):
胰蛋白胨 |
20g |
氯化钠 |
5g |
磷酸氢二钾 |
2.75g |
磷酸二氢钾 |
2.75g |
月桂基硫酸钠 |
0.1g |
最终pH7.1±0.2
使用方法:
1、 称取本品30.7g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,每管9mL。
2、 116℃高压灭菌10min,冷至30℃左右,无菌操作每100ml肉汤里加入配套试剂1支(SR0010)。
3、 以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种三管培养基。
4、 37±1℃培养18—24h。
5、 在波长366nm紫外灯下观察荧光。
质量控制:
质控菌株接种后于37±1℃培养24h结果如下:
菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
培养特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
良好 |
肉汤混浊,有荧光 |
产气肠杆菌 |
CMCC(B)45103 |
良好 |
肉汤混浊,有荧光 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B)50115 |
良好 |
肉汤混浊,无荧光 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
不长 |
----- |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
参考文献:
1.GB/T 4789 .32—2002
食品卫生微生物学检验标准 大肠菌群快速检测。
资料提供:广东环凯微生物科技有限公司