哥伦比亚琼脂培养基(Columbia Agar Base)
用 途:
用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》2010年版)。
原 理:
酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;羊血是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血球不被破坏。庆大霉素能抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。
配方(每升):
酪蛋白胰酶消化物 10.0g
心胰酶消化物 3.0g
玉米淀粉 1.0g
肉胃酶消化物 5.0g
酵母浸出粉 5.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 15.0g
最终pH7.3±0.2
使用方法:
1、 称取本品44.0g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,在45~50℃,每100.0毫升培养基加入5.0~10.0ml无菌脱纤维羊血,可配成血琼脂;如检测梭菌,每100ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0160)(33.3mg/L硫酸庆大霉素),均匀,倾注平板。
2、 接种菌株至平板上划线,35~37℃厌氧培养18~24小时;(药品)取培养物0.2ml涂抹于平板30~35℃厌氧培养48~72h。
3、 观察结果。
质量控制:
下列质控菌株接种至本培养中于35~37℃培养24h结果如下:
(添加血)
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征
单核细胞增生李斯特氏菌 CMCC(B)54002 良好 窄小β溶血环
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 良好 β溶血环
乙型溶血性链球菌 CMCC(B)32210 良好 β溶血环
肺炎链球菌 CMCC(B)31001 良好 α溶血环
下列质控菌株接种至本培养中于30~35℃培养48~72h结果如下:
(添加庆大霉素)
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征
产气荚膜梭菌 ATCC13124 良好 灰白色
铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104 抑制 --
大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102 抑制 --
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. 《中华人民共和国药典》2010年版,附录XI J 微生物限度检查。