显微鉴别根横切面
（1）威灵仙表皮细胞1列，排列紧密，外壁增厚显深棕色。外皮层细胞排列紧密；皮层宽广，细胞有明显的纹孔，含淀粉粒、草酸钙砂晶，有的细胞含挥发油；内皮层明显，可见凯氏带。韧皮部狭窄。初生木质部二原型，全部木化，导管直径较大，木纤维与木薄壁细胞壁较厚。根茎部及较老根的韧皮部可见少数木化的纤维及石细胞。
（2）棉团铁线莲老根及嫩根均无韧皮纤维。中柱较小，皮层较宽。
（3）辣蓼铁线莲嫩根韧皮部无或有极少纤维；老根韧皮部纤维较多。初生木质部为明显的二原型，导管孔大。
（4）毛柱铁线莲皮层中有多数木化的厚壁细胞散在。
（5）柱果铁线莲初生木质部四原型，有4个凹弧部，其外侧韧皮部中各有1大形的木化韧皮纤维束。导管分布于木质部外侧，排列成行。
化学鉴定
（1）取本品水提取液（1：10），置试管内用力振摇后产生持久性泡沫。分别取提取液1ml放入两支试管内，一管加5%氢氧化钠2ml，另管加入5%盐酸2ml，振摇后，两管持续存在的泡沫高度相等。（检查三萜类皂甙）[2]
（2）将本品甲醇提取液（1：2）放入试管内，蒸去甲醇，加入醋酐1ml，沿试管壁滴加浓硫酸，则两液交界处呈现红色环，最后变成蓝色。（检查三萜类）
（3）取本品粗粉10g，加入苯200ml，放入锥形瓶内密闭，放置过夜，滤过。滤液回收苯至于，放冷，加入1%盐酸羟胺及10%氢氧化钾（1：1）混合液2ml，在室温放置10min，加入10%盐酸至pH3-4后，再加1%三氯化铁试液1-2ml，则产生红色沉淀。（内酯反应，检查白头翁素）
（4）薄层色谱取本品粗粉50g，加水浸泡24h（30℃）后，用水蒸气蒸馏，收集馏出液，以氯仿萃取3次，氯仿与馏出液之比为1：10、1：20、1：20。萃取液在45-50℃减压回收氯仿至小体积，作为供试品溶液。另取白头翁素对照品少许用氯仿溶解后作为对照品溶液。分别吸取供试品与对照品溶液点样于同一硅胶G薄层板上。以苯-乙醚（4：1）展开19cm。喷0．5%2，4-二硝基苯肼试液后，于80℃烘干30min显色。上述5种供试品溶液色谱在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
