4.8.2 防霉剂效力的评定
根据现行的GB13092—91《饲料中霉菌检验方法》，结合试验室常规的检测手段和条件，推荐如下防霉剂效力评定方法。在评定实验中，以未加防霉剂的饲料作为对照组，以加防霉剂的饲料作为实验组。实验组和对照组各设6个重复小组。
4.8.2.1 检测饲料的霉菌数
通过检测霉菌数来评定防霉剂效力的方法均是依据同一原理：选择适宜霉菌生长而不适宜细菌生长的培养基（高盐察氏培养基、孟加拉红培养基），采用平皿计数的方法，测定霉菌数。此方法操作简便，也可用于检测饲料各原材料的带菌程度。同时可将加有防霉剂的培养物与未加防霉剂的饲料空白培养物做对比，结合低倍活物镜检，初步确定各防霉剂有效抑制霉菌的种属，可看出各防霉剂对各种霉菌杀菌作用力。
合格防霉剂抑制饲料中霉菌总数在100×103个/克以下。
4.8.2.1.1 饲料强化防霉试验
提高饲料水分（16%～18%），恶化环境（高温、高湿：培养箱温度35～38℃，相对湿度95%以上培养），促使饲料尽快发霉。定期检验霉菌数，根据霉变严重程度和测霉菌数来判断防霉效果。
霉菌总数按照GB13092—91规定的方法测定。
4.8.2.1.2 饲料常规试验
该方法是以正常饲料（水分自然11%～12.5%）在自然环境下储放，按规定的时间抽样进行霉菌检测判定其防霉效果，具体方法同强化防霉试验法。此法可作为防霉剂的终选试验。
4.8.2.2 防霉期的检验
在GB13092—91规定的检验霉菌数的试验条件下，恒温箱控制温度在25±1.0℃，相对湿度60±2.0%，每组检样不少于5.0㎏，饲料水分13.0%，基础饲料先进行高温灭菌处理，防霉剂浓度按有机酸占饲料的0.15%或按产品的推荐量添加。添加后每隔15日取样检验，试验期60天。合格防霉剂应具备的功效：15d、30d、45d、60d取样检验，试验组的霉菌总数、霉菌毒素均应低于对照组。且试验组15d、30d、45d、60d时观察，外观无霉变。感官指标与未加防霉剂时一致。
多种防霉剂效力比较，霉菌数越少，霉素毒素含量越低和防霉期越长，防霉效力越佳。
4.8.2.3 试验结束，对试验数据进行统计、评定产品防霉效果。
4.8.3 抗氧化剂效力的评定
4.8.3.1 以未加抗氧化剂的油脂作为对照组。以加抗氧化剂的为实验组。实验组和对照组各设6个重复小组。
4.8.3.2 取加入抗氧化剂的油脂试样20g，置于试管中，放在80℃的恒温水浴上，让其氧化，过一定时间，测定酸价，根据酸价判断各种抗氧化剂的抗氧化能力。油脂水解和由过氧化物分解而产生游离脂肪酸都使酸价升高。酸价是指中和1g油脂中的游离脂肪酸所需KOH的毫克数。
4.8.3.3 试验结束，对试验数据进行统计，评定产品抗氧化效果。
4.9 安全性评价--毒理学试验
毒理学试验由农业部指定单位（经计量认证的省级以上卫生监督检验机构或省级防疫站）承担，出具正规、有效的安全性评价试验报告。
4.9.1 毒理学试验的四个阶段和内容
4.9.1.1 第一阶段：急性毒性试验
经口急性毒性：LD50，联合急性毒性。
4.9.1.2 第二阶段：遗传毒性试验，传统致畸试验，短期喂养试验。
遗传毒性试验的组合必须考虑原核细胞和真核细胞、生殖细胞与体细胞、体内和体外试验相结合的原则。
4.9.1.2.1 细菌致突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验）为首选项目，必要时可另选和加选其他试验。
4.9.1.2.2 小鼠骨髓微核率测定或骨髓细胞染色体畸变分析。
4.9.1.2.3 小鼠精子畸形分析和睾丸染色体畸变分析。
4.9.1.2.4 其他备选遗传毒性试验：V79/HGPRT基因突变试验、显性致死试验、果蝇伴性隐性致死试验，程序外DNA修复合成（UDS）试验。
