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山梨醇麦康凯琼脂基础(SMAC)

时间:2016/3/21 15:25:00 来源:网友

山梨醇麦康凯琼脂基础(SMAC)        (Sorbitol MacConkey Agar)

用    途:

用于致病性大肠杆菌(包括O157:H7)的分离培养(SN/T0973-2000和SN/T 1827-2006 )。

原    理:

蛋白胨、月示胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;山梨醇为可发酵的糖类;猪胆盐、结晶紫、亚碲酸钾和头孢克肟抑制革兰氏阳性菌;中性红为pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升):

蛋白胨 17g

月示胨 3g

猪胆盐   5g

氯化钠   5g

琼脂 15g

山梨醇   10g

结晶紫   0.001g

中性红 0.025g

最终pH7.2±0.2

使用方法:

1、 称取本品55g,加入蒸馏水或去离子水1000毫升,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶。

2、 121℃灭菌15min,待基础培养基冷至50—55℃时,每500毫升培养基加入配套试剂1支(SR0020)(1.25mg亚碲酸钾),如需增强对杂菌的抑制作用,可添加0.01mg头孢克肟至500毫升培养基中,混匀并倾注灭菌培养皿,凝固后备用。

3、 将增菌后的m(EC)n肉汤进行10倍递增稀释,从10-4、10 –5、10 –6,各取0.1毫升滴于SMAC平板上以灭菌L棒进行涂布后,置于36±1℃培养18-24小时。

4、 观察结果。挑取SMAC平板上呈淡褐色中心,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

质量控制:

质控菌株接种后于36±1℃培养18-24小时,结果如下:

菌    名 菌    号   生长状况   菌落特征

大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC12900 良好 无色

大肠埃希氏菌 ATCC25922   良好 粉红色,周围有胆盐沉淀

金黄色葡萄球菌 ATCC6538 受抑制 -

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:250g

参考文献:

1. SN/T 0973-2000 中华人民共和国进出口商品检验检疫行业标准 进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157:H7 检验方法

2. SB/T10462-2008 中华人民共和国国内贸易行业标准 进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157:H7 检验方法

3. SN/T 1827-2006 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中产志贺毒素大肠杆菌检验方法


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