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李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)

时间:2016/3/16 14:05:00 来源:网友

李氏增菌肉汤基础(LB1,LB2)(Listeria Enrichment Broth Base)

用    途:

用于李斯特氏菌的选择性增菌培养(GB 4789.30-2010)。

原    理:

胰胨、多价胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;李斯特氏菌可耐受较高含量的氯化钠,同时对肠球菌起抑制作用;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂;七叶苷为可发酵的糖类;萘啶酮酸和吖啶黄为选择性抑菌剂。

配方(每升):

胰胨   5g

多价胨   5g

酵母膏粉   5g

氯化钠   20g

磷酸二氢钾 1.35g

磷酸氢二钠 12g

七叶苷 1g

最终pH7.3±0.2

使用方法:

1、 称取本品49.4g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟。

2、 每225ml基础加入LB1配套试剂1支(SR0100)(盐酸吖啶黄素2.7mg和萘啶酮酸4.5mg),每200ml基础加入LB2配套试剂1支(SR0110)(盐酸吖啶黄素5.0mg和萘啶酮酸4.0mg)。

3、 无菌采取检样25g(mL)放灭菌均质器中加225 mL LB1增菌液中,充分搅拌成均质。如不能及时检验,可暂存4℃冰箱。

4、 LB1增菌液225 mL放30±1℃培养24小时后,取出0.1 mL加入10 mLLB2增菌液中二次增菌。于30±1℃培养24小时,做进一步的分离试验。

质量控制:

质控菌株接种LB1、LB2后于30±1℃培养24小时,结果如下:

菌    名               菌    号            生长状况

单核细胞增生李斯特氏菌     CMCC(B)54002          良好

大肠埃希氏菌             ATCC25922            受抑制

粪链球菌             CMCC(B)32223           受抑制

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:250g

参考文献:

1.GB/T4789.30-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验

2.GB/T4789.28-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法,培养基和试剂

3.GB/T4789.30-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验

4.GB 4789.30-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验



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