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牛津琼脂基础

时间:2016/3/16 14:03:00 来源:网友

牛津琼脂基础        (Oxford Agar Base)

用    途:

用于单核增生李斯特氏菌的选择性分离(SN0184-2005)。

原    理:

多价胨和可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;李斯特氏菌水解七叶苷与铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;氯化锂和其它的抗生素能抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升):

多价胨 19g

可溶性淀粉   1g

氯化钠   5g

琼脂   15g

七叶苷     1g

柠檬酸铁铵     0.5g

氯化锂 15g

最终pH7.0±0.2

使用方法:

1、称取本品56.5g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟。

2、临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,将放线菌酮0.4 g、多粘菌素E 0.02g、盐酸吖啶黄0.005g、头孢双硫唑甲氧0.002g、磷霉素0.01g溶于5mL乙醇和5mL水中制成混合溶液并过滤除菌, 每100 mL培养基中加入1mL混合溶液,摇匀后倾注灭菌培养皿。

3、取待检菌划线接种于牛津琼脂平板上。于35℃培养24—48h。

4、观察结果。李斯特氏菌在牛津琼脂平板上生长24h后菌落呈黑色,直径为1 mm,在其周围形成一个黑色环。培养48h,直径3—4 mm,除在菌落周围在一环外,在菌落中心部位的深层也形成黑点。挑取5个可疑菌落,接种于TSA-YE平板上,纯培养后进行鉴定。              

质量控制:

质控菌株接种后于35℃培养24-48h,结果如下:

菌    名 菌    号   生长状况 培养特征

单核细胞增生李斯特氏菌 CMCC(B)54002   良好   灰绿色菌落,中心凹陷黑色,周围有黑色,φ3-4mm

大肠埃希氏菌   ATCC25922 受抑制   ——

粪链球菌       CMCC(B)32223 受抑制 ——

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:100g

参考文献:

1.SN/T 0184-93  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

2.SN/T 0184.1-2005  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

3.SN/T 0184.2-2005  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验 第2部分 多重PCR方法



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