2.2氯霉素的检测方法。测定氯霉素可以用生化方法,但这些方法的灵敏度偏低0.5ug/g~1ug/g,在多数情况下主要采用GC和HPLC及色质联用的方法,也有薄层色谱法的报道,但过程繁琐,显色复杂。美国食品药物管理局FDA最近通报了美方现行的氯霉素检测方法:用CHARM-II方法筛选,用LC-MS方法进行确认,检测限量由原来的5ug/kg降为现在1ug/kg,再降为0.3ug/kg,且FDA正在研究应用更敏感的方法,可使检测限达到0.1ug/kg。国内也对氯霉素快速检测进行了研究开发。如湖南长沙的福科特生物化学有限公司已经在出售氯霉素免疫检测试剂盒。前些时候美国从中国进口的数批水产品虾中检出氯霉素,有关生产加工单位已被FDA列入自动扣留名单,并将增加对中国进口虾的抽样比例。我国针对此情况也会采取相应措施。
转基因原料和食品的检测技术是必不可少的。转基因食品的安全性检验,第一步是对受检产品进行鉴定,以区别转基因食品与非转基因食品,筛选出在遗传分化过程中已失去转基因特性的产品;第二步是对受检产品中导入的基因重组体构成的变异情况进行检测,以确定其表达的忠实性及外源基因对受体生物原基因组表达的影响。当前,国际社会对转基因食品检测采用的技术路线主要有两条。
(1)检测外源DNA。主要是以核酸为基础的PCR检测方法,通过PCR技术和核酸探针的杂交检测技术,来准确快速地检测外源基因。由于PCR具有敏感性高的特点,且食品加工过程中核酸变性程度不及蛋白质,因此,目前转基因食品的定量检测仍基于PCR。主要包括半定量PCR法、定量竞争PCR法、实时定量PCR法、以及PCR-ELISA法等。其中PCR-ELISA法是一种将PCR的高效性、高灵敏度与ELISA的高准确度相结合的方法,它是以地高辛标记的特异性探针诱捕PCR产物在合适条件下杂交,再用碱性磷酸酯酶标记的链霉亲和素进行ELISA反应,既适合于快速的定性筛选又可进行准确的定量分析。结果通过酶标仪直接输出,无人为误差,可靠性强,动化程度高,易于操作。方法灵敏度高达0.1%,足以达到欧盟的要求(转基因检测阈值为1%),利用PCR-ELISA对转基因大豆的检测灵敏度比欧盟推荐PCR方法提高5~10倍。
(2)检测外源蛋白质。此方法灵敏度高,易于处理操作,但只适用于原料性食品,难于应用于加工品,因为外源基因表达的蛋白会因加工而失活、分解或消失,增加了检测的不确定性和较差的重复性,同时也提高了假阴性率。目前,美国FDA已研究出用双夹心ELISA法检测食品中是否含有转基因玉米成分。蛋白质印迹法普遍用于分离、检测特异的目的蛋白质,灵敏度为1ng~5ng。VanDuijn等人用蛋白质印迹法检测RRS中的CP4合成酶,检测限在0.5%~1%,经验证这种方法可应用于转基因大豆原材料和大豆蛋白质产品的检测。
试纸条法的原理与ELISA法相似,操作相对简单,且不需要特殊实验设备,适用于现场检验或初筛。快速检测试剂盒法也具有操作简单、使用方便的优点,但在检测结果的正确性方面因较少的称取样量,可能会受到影响。
随着全球经济一体化的发展,各国间贸易往来日益增加,科技信息的频繁交流,食品安全已经跨越国界。某一地区的食品安全问题很有可能波及全球。因而食品安全问题已成为21世纪世界各国政府和消费者所广泛关注的共同焦点。完善食品的安全检测体系,加强我国食品的立法和管理工作,提高食品安全检测技术水平迫在眉睫。因此应该进一步寻找快速简便精确的实验方法,加强国际合作与交流,确定通用检测标准,让具有安全保障的食品进入百姓餐桌。