国家粮食储备局科学研究院 孙辉
生物试剂盒是利用免疫化学技术的基本原理,即抗原抗体能够特异性结合的原理,对某些生物化学成分(如酶、激素、病菌毒素以及农药残留等)进行检测的一种方法。随着现代科学的进步以及免疫学理论的发展,已经广泛应用于医学及农业等各个领域。在植物学领域主要用于研究一些抗原性物质的识别、鉴定和定位等。
在国外,将免疫化学技术应用于小麦品质及其制品方面的研究始于80年代中期,经过十几年的发展,目前已有一系列的试剂盒产品被广泛地应用于生产和科研等领域。在这一研究领域成绩斐然的有两个研究机构:英国的AFRC和澳大利亚的CSIRO。从国外的研究结果来看,只要得到特异性的抗体,利用多个抗体的组合(尤其是单克隆抗体和多克隆抗体的组合),就可以利用免疫学的方法测定小麦及其制品的某些成分。目前,国外已经开发出一系列的试剂盒,可以用来鉴别小麦制品中的非麦类掺杂物和面包小麦中加入的非面包小麦,以及面筋限制类食品中面筋的含量,如用小麦醇溶蛋白做抗原制备的试剂盒,可以测定0.015%~10%范围内的面筋含量。其产品分为两类:一种能对各种样品(原始、蒸煮和加工)中的面筋进行测定,主要供工业和政府职能部门进行实验室测定,另一种试剂盒能进行快速和半定量测定,适用于家庭和加工商。此外,生物试剂盒还可以用来对小麦α-淀粉酶活性、杀虫剂和真菌毒素等对小麦子粒的污染程度等的测定。小麦α-淀粉酶活性可以用一种5分钟的免疫层析法进行简易的现场测定,称之为“WheatRite”检测方法。其操作步骤为:将小麦样品磨碎加入到盛有盐溶液的测试管中,摇晃15秒钟,取2滴加入试剂盒中,关闭试剂盒,静置5分钟之后就可以读取结果了。当然,用这种方法得到的数据不可能像降落数仪一样精确,是以降落数值50秒为单位,但由于实际操作中,人们对小麦或淀粉降落数值的要求也只是一个范围,如小麦新国标中规定优质强筋小麦和弱筋小麦的降落数值≥300即可,因此,“WheatRite”法数据的精确度已经足够了。用这种方法检测的α-淀粉酶的活性与用传统的降落值法测定的结果完全一致,而且操作简便,费用低廉,还可以在小麦收割前进行,从而避免将发芽小麦与正常小麦混合在一起。竞争性酶联免疫分析的方法可以用于真菌毒素和杀虫剂的商业性实地检测,所需时间为10~20分钟。只要将样品和酶-毒素/杀虫剂的结合体加入抗体包被的点样孔中,
冲掉没有结合上的酶和毒素/杀虫剂,再加入显色剂,通过比较样品点与对照点颜色的深浅就可以判断小麦子粒受毒素或杀虫剂污染的程度了。
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