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MRS培养基(莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础)

时间:2016/3/10 15:10:00 来源:网友

MRS培养基(莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础)

(Man Rogosa Sharpe Medium)(Li-Mupirocin Modified MRS Medium Base)

用    途:

用于乳酸菌的分离、计数和培养。(GB/T 4789.35-2010,SN/T1941.1-2007和ISO标准)

原    理:

蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升):

蛋白胨 10g

牛肉膏粉 5g

酵母膏粉 4g

葡萄糖 20g

吐温-80 1ml

磷酸氢二钾 2g

乙酸钠 5g

柠檬酸三铵 2g

硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.2g

硫酸锰(MnSO4.4H2O) 0.05g

琼脂 15g

最终pH  6.2±0.2

使用方法

1、 称取本品64.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。

2、 无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内,振摇均匀,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。

3、 将培养基凉至50℃左右,注入平皿中约15mL,待琼脂凝固。

4、 选择2-3个合适的稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,吸取0.1mL稀释液于平皿上,用L型棒涂布,每个稀释度做2个平皿。翻转平板,乳杆菌在兼性厌氧条件,双歧杆菌在厌氧条件下,混合菌应分别兼性厌氧和厌氧条件下,36±1℃培养48h。

5、 选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数,并乘以相应的稀释倍数,以10的指数表示进行报告。

质量控制:

下列质控菌株接种后于36℃±1℃兼性厌氧培养48h结果如下:

菌    名 菌    号 生长率 培养特征

保加利亚乳杆菌 AS1.1482 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

干酪乳杆菌 HK10031 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

嗜热链球菌 IFFI6038 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

婴儿双歧杆菌 CICC6069 ≥90% 圆形,中等大小,边缘整齐,瓷白色

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:250g

参考文献:

1.GB/T4789.35-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

2.GB 4789.35-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

3.SN/T1941.1-2007 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中乳酸菌检验方法 第1部分 分离与计数方法。

4.ISO 15214-1998 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the emumeration of mesophilic lactic acid bacteria-----Colony-count technique at 30℃.



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