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改良CCD琼脂

时间:2016/3/9 15:18:00 来源:网友

改良CCD琼脂

Modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar,mCCDA

用    途:

用于空肠弯曲菌的选择性分离培养。(GB4789.9-2008,ISO标准)

原    理:

肉浸液、动物组织酶解物、酪蛋白酶解物提供碳、氮源、维生素、生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;木炭具有解毒、收集二氧化碳和改变表面张力的作用;去氧胆酸钠为选择性抑菌剂;头孢哌酮可抑制普通肠道菌生长、两性霉素B 抑制酵母和真菌生长、利福平可抑制非弯曲菌其他厌氧菌。硫酸亚铁和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。

基础配方(每升):

肉浸液 10g

动物组织酶解物 10g

氯化钠 5g

木炭 4g

酪蛋白酶解物 3g

去氧胆酸钠 1g

硫酸亚铁 0.25g

丙酮酸钠 0.25g

琼脂 12g

最终pH 7.2±0.2

配套试剂配方:(每100mL)

头孢哌酮 0.0032g

两性霉素B 0.001g

利福平 0.001g

使用方法:

1. 称取本品45.5g,加入蒸馏水或去离子水1000mL搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。

2. 每支冻干配套试剂在无菌操作条件下加入1mL无菌水,45℃水浴加热完全溶解。将灭菌培养基融化并冷却至45℃左右,每100mL基础培养基加入1瓶配套试剂SR0320混合后倾注平板。

3. 用接种环挑取24h增菌液、48h增菌液及相应的1:50稀释液,划线平板,在微需氧条件,42℃±1℃培养48±2h。

4. 观察结果。

质量控制:

下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下:

菌    名 菌    号 生长率  菌落特征

空肠弯曲菌 ATCC33291 >70% 扁平,灰色,湿润,有光泽,呈沿线扩散生长,不溶血,不规则边缘

大肠埃希氏菌 ATCC25922 全部抑制(0) 无特征性菌落或微弱生长(1)

金黄色葡萄球菌 ATCC6538   全部抑制(0)  无特征性菌落  

白色念珠菌 ATCC10231 微弱生长(1) 无特征性菌落

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:250g

参考文献:

1. GB/T  4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

2. 美国FDA  Bacteriological Analytical Manual   Chapter 7   Campylobacter

3. ISO10272-1995 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for detection of thermotolerant Campylobacter



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