肉与 肉制品 维生素C含量测定

中华人民共和国国家标准
肉与 肉制品 维生素C含量测定
GB/T 9695.29-91
Meat products-Method for determination of vitamin C content

1 主题内容与适用范围
本标准规定了肉制品中维生素C含量的测定方法。
本标准适用于肉制品中维生素C含量的测定。
2 引用标准 GB 9695.19 肉与肉制品 取样方法
3 原理 试样中的维生素C用偏磷酸提取后,经2,6-二氯靛酚氧化成脱氢维生素C,与邻苯二胺反应,生成具有紫蓝色荧光的喹(口恶)啉衍生物。在激发波长350nm,荧光波长430nm处测定其荧光强度。
4 试剂
4.1 抗坏血酸标准溶液：1mg/mL 精确称取抗坏血酸50mg,用5%偏磷酸溶液溶解并定容到50mL棕色容量瓶中。测定时 再稀释到25μg/mL。
4.2 偏磷酸：5%溶液。
4.3 乙酸钠(GB 693):50%溶液。
4.4 硼酸(GB 628)-乙酸钠溶液。 将3g硼酸溶于50%乙酸钠溶液中并稀释到100mL。
4.5 95%乙醇(GB 678):50%溶液。
4.6 硫脲：3%溶液。 将3g硫脲溶于50%乙醇溶液中并稀释到100mL(临用前配制)。
4.7 盐酸邻苯二胺：0.02%溶液。
4.8 2,6-二氯靛酚:0.2%溶液。
5 仪器与设备
5.1 实验室常规设备;
5.2 荧光分光光度计；
5.3 绞肉机:孔径不超过4mm。
6 试样
6.1 按GB 9695.19取样;
6.2 取有代表性的试样200g,于绞肉机中至少绞两次并使其混匀,在密闭容器中于4℃下贮存备用。
7 分析步骤
7.1 提取 称取试样2～5g(精确至0.001g)置于烧杯中,加入20mL50%偏磷酸溶液,充分搅拌后,全部移入100mL容量瓶中并定容。混匀后过滤，滤液备用。
7.2 测定 分别取滤液1mL加入2支试管中,取标准抗坏血酸溶液(25μg/mL)1mL分别加入另外2支试管,向各管中加入2,6-二氯靛酚溶液0.1mL,充分混匀,此时溶液呈微红色,再加入硫脲溶液0.1mL摇匀,使过量的2,6-二氯靛酚还原(粉红色刚刚褪去)。取试样管、标准管各1支分别加入乙酸钠溶液1mL;另2支为空白管,分别加入硼酸-乙酸钠溶液1mL摇匀。在室温下放 置15min,分别加入盐酸邻苯二胺溶液5mL摇匀后在暗处放置35min。以激发波长350nm,发射 波长430nm,测定生成物的荧光强度。
8 分析结果的计算
　　　Ii-Io　　　 c 　　　v
X = ───- × ──- × ──×f×100
　　 Qi-Qo 　　1000 　　　m
式中:X--试样中维生素C含量,mg/100g;
Ii--试样溶液的荧光强度;
Io--试样空白溶液的荧光强度;
Qi--标准溶液的荧光强度;
Qo--标准空白溶液的荧光强度;
c--标准溶液的浓度,μg/mL;
f--试样溶液的稀释倍数;
v--试样溶液的最初体积,mL;
m--试样质量,g。
当符合允许差规定的要求时,取两次测定结果的算术平均值作为结果,精确到0.01mg/ 100g。
9 允许差 同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得大于平均值的20%。

附加说明:
　　　本标准由中华人民共和国商业部提出。
　　　本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。
　　　本标准由中国肉类食品综合研究中心起草。
　　　本标准主要起草人裴显庆、蒲健。

国家技术监督局1991-03-26批准 1991-12-01实施