中华人民共和国国家标准
GB 9822-88
Method for determination of insoluble dietary fiber in cereals
1 主题内容与适用范围
本标准规定了谷物不溶性膳食纤维测定所用仪器、试剂、分析步骤和结果计算。
本标准适用于谷物不溶性膳食纤维的测定。
2 方法原理
谷物样品经中性洗涤剂溶液浸煮,残渣用热水充分洗涤后,加入a-淀粉酶溶液以分解残留的结合态淀粉,再用水、丙酮洗涤,烘干,即为不溶性膳食纤维。
3 仪器和设备
3.1 提取装置:由瓶口装有冷凝器的300mL锥形瓶和可将100 mL水在5～10 min内由室温升至沸腾的可调电热板组成。
3.2 F3-2玻璃过滤坩埚(2号滤片,30 mL容积)。
3.3 电热烘箱。
3.4 电热培养箱：温度保持在37±2℃。
3.5 干燥器：装有有效干燥剂。
3.6 过滤装置：由玻璃过滤坩埚和吸滤瓶组成,用水泵或真空泵抽滤。
3.7 粉碎机。
4 试剂
本标准所用试剂,除特别注明者外,均为分析纯,水为蒸馏水。
4.1 十二烷基硫酸钠：化学纯。
4.2 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)(GB1401)。
4.3 四硼酸钠(GB 632)。
4.4 磷酸氢二钠(GB 1263)。
4.5 乙二醇一乙醚：化学纯。
4.6 十氢萘：化学纯。
4.7 无水亚硫酸钠。
4.8 石油醚：沸程范围30～60℃。
4.9 磷酸二氢钠(GB 1267) 。
4.10 丙酮(GB 686)。
4.11 a-淀粉酶1)(酶活性不低于每毫克800 A)。
注:1)可采用上海生物化学研究所试剂厂生产的a-淀粉酶结晶冻干粉或类似产品。酶活测定方法见GB9826《小麦粉破损淀粉测定法 a-淀粉酶法》附录A(补充件)a-淀粉酶活性的测定。
4.12 甲苯(GB 684)：化学纯。
4.13 中性洗涤溶液的制备：将18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠用150mL水加热溶解,另将30g十二烷基硫酸钠和10mL乙二醇一乙醚溶干700mL热水中,然后加入到第一种溶液中。4.56g磷酸氢二钠溶于150 mL热水中,加入到第一种溶液中。如果需要, 用磷酸调节pH到6.7～7.1,使用时若有沉淀形成,可加热到60℃使沉淀溶解。
4.14 a-淀粉酶溶液的配制：用0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1 mol/L磷酸二氢钠溶液各500mL,混匀,配成0.1mol／L磷酸缓冲液。称取12.5mg a-淀粉酶,用0.1mol/L磷酸缓冲液溶解,定容至250 mL。
5 分析步骤
5.1 样品制备:谷物样品经合适的粉碎机一次研磨后全部通过1mm筛孔(试样细度约20～60目)。
5.2 精确称取制备好的样品0.500～1.000g,放入300 mL锥形瓶中。
5.3 顺序加入：(a)100 mL中性洗涤溶液;(b)2mL十氢萘;(c)0.50g无水亚硫酸钠。
5.4 在5～10min内,将300mL锥形瓶的内容物加热至沸腾,从沸腾开始计时,微沸1h。
5.5 洁净的玻璃过滤坩埚在110℃烘箱内干燥4h,放入干燥器中,冷却后称量,直至恒重。将经过中性洗涤溶液处理的纤维残留物加入,抽滤,用不少于300 mL的 100℃水清洗。
5.6 加入5 mLa-淀粉酶溶液,抽滤,以置换清洗用水,然后用合适的胶塞塞住玻璃过滤 坩埚的底部,加入20mL酶液和几滴甲苯。
5.7 放入37±2℃的培养箱中,保温18 h。
5.8 取下塞子,抽滤,用不少于500 ml水清洗纤维残留物,再用约75 mL丙酮清洗。在100℃的烘箱中干燥4h,然后放入干燥器中,冷却后称量,直至恒重。
6 结果计算
6.1 计算公式：
m2 - m1
不溶性膳食纤维(%) = ─────× 100
m
式中：m1──玻璃滤器烘干质量,g；
m2──玻璃滤器及残留物烘干质量,g；
m──试样质量,g。
7 允许差
两个平行试样的测定值最大允许差为1.0％。以其算术平均值作为测定结果,保留一位小数。
附加说明：
本标准由商业部粮食储运局归口。
本标准由商业部谷物油脂化学研究所负责起草。
本标准主要起草人潘铎。
中华人民共和国商业部1988-07-06批准 1989-03-01 实施
