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大肠杆菌O157:H7显色培养基

时间:2016/2/23 15:39:00 来源:网友

大肠杆菌O157:H7显色培养基         (Chromogenic E.coli O157:H7 Agar) 

用   途:

用于大肠杆菌O157:H7的快速分离和鉴定。(SN/T 1827-2006)         

原   理:

蛋白胨提供碳源和氮源;胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合碳水化合物为可发酵的糖类;中性红是pH指示剂,细菌发酵糖产酸时菌落呈桃红色;亚碲酸钾抑制非大肠杆菌O157:H7菌的生长;混合色素与大肠杆菌O157:H7所具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在浅红色平板上产生蓝绿色的菌落。

配方(每升):

蛋白胨                             8.6g

氯化钠                             5g

混合碳水化合物       25g

中性红      0.015g

胆盐                               1.5g

混合色素      0.3g

琼脂                               15g

最终pH 7.0±0.2 

使用方法:

1、称取本品55.4g,加入蒸馏水或去离子水1000毫升,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶。

2、待基础培养基冷至50℃时,每100毫升培养基加入1瓶(SR0200)无菌亚碲酸钾溶液1mL,如样品中含有较多的变型杆菌,可添加0.0025mg头孢克肟至100毫升培养基中,混匀并倾注灭菌培养皿,凝固后备用。

3、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液,用接种环取1环增菌液,划线接种于显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。

4、观察结果。挑取显色平板上呈蓝绿色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

5、对疑似大肠杆菌O157:H7菌落可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验和O157:H7菌血清学试验。 

质量控制:

本品倾注平皿后呈浅红色,下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:

菌   名               菌   号       生长状况             菌落特征

大肠杆菌O157:H7     NCTC12900        良好                蓝绿色

大肠杆菌HK70115   良好  深蓝色

大肠杆菌         ATCC25922        受抑制     桃红色

粪肠球菌              ATCC29212   受抑制    -

贮   存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

规   格:可配置1L的培养基干粉。

参考文献:

1.       SN/T 1827-2006中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口食品中产志贺毒素大肠杆菌检验方法


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