霍乱弧菌显色培养基

霍乱弧菌显色培养基          (ChromogenicVibrio CholeraeAgar) 

用   途：

用于水产品及食物中毒样品中霍乱弧菌的分离和鉴定。 

原   理：

蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；蔗糖为可发酵的糖类；抑菌剂抑制大部分非霍乱弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；色素与霍乱弧菌所具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。 

配方（每升）：

蛋白胨                       15g

酵母膏粉                     5g

蔗糖                         10g

氯化钠                       5g

抑菌剂                       5g

琼脂                         13g

色素                         3.1g

最终pH 9.2±0.1 

使用方法

1、取瓶内干粉56.1克，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。

2、以无菌操作取检样25 g（mL），加入碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min，或拍击式均质器拍击2 min，制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500 mL的灭菌容器内，加225 mL碱性蛋白胨水，并充分振荡。

3、增菌：将上述1:10稀释液于36℃±1℃培养6h～8h，如有需要可进行二次增菌。

4、分离

在增菌液中用接种环取一环，于霍乱弧菌显色平板上划线分离，于36℃±1℃培养18 h～24 h。

5、通过验证试验进一步确认假定性霍乱弧菌，如氧化酶、革兰氏染色等。 

质量控制：

本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表：

注：最后的鉴定须做补充试验。 

外观：

脱水培养基：浅黄色具流动性粉未。

制备好平板：淡黄色的胶。

储存条件和保质期：

脱水培养基：10-30℃，保质期二年。  制备好平板：2-8℃，最多保存两周。 

结果判断