食品行业知识资料网站
用户中心
行业资料 实用资料 质量管理 健康生活 经营管理 最新资料
关键词:
站点位置: 首页 > 知识资料 > 行业资料 > 食品检测 > 实验用品 > 正文 【设置字号: 【手机阅读】

实验室常用贮存液的配制

时间:2013/9/23 14:29:00 来源:网友

1.30%丙烯酰胺溶液 

『配制方法』将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中.

加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用0.45μm孔径滤器过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温.

→〖注意〗丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性. 称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具.

可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作. 因为它还可能会含有少量未聚合材料.

有些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后过滤以纯化之(建议使用Whatman

1号滤纸过滤,鸿跃公司有售). 在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸.

2.40%丙烯酰胺

『配制方法』把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中.

继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L.

→〖注意〗见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定.

3.放线菌素D溶液

『配制方法』把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值.

放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃.

→〖注意〗放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤.

另,药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂.

只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用.

4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液

『配制方法』在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L

NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃.

5.10mol/L乙酸酰溶液

『配制方法』把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌.

6.10%过硫酸铵溶液

『配制方法』把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周.

7.BCIP溶液

『配制方法』把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.

8.2×BES缓冲盐溶液

『配制方法』用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g

Na2HPO4,室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃.

9.1mol/L CaCl2溶液

『配制方法』在200ml蒸馏水中溶解54g

CaCl2•6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃.

→〖注意〗制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃.

10.2.5mol/L CaCl2溶液

『配制方法』在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.

11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液

『配制方法』用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃.

→〖注意〗DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理.

12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

『配制方法』把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l

Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃.

13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

『配制方法』在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2•2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g

NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用.

→〖注意〗EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解.

14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)

『配制方法』在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温,

→〖注意〗溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩.

15.2×HEPES缓冲盐溶液

『配制方法』用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g

Na2PO4•2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml.

用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃.

16.IPTG溶液

『配制方法』IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g

IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.

17.1mol/L乙酸镁溶液

『配制方法』在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌.

18.1mol/L MgCl2溶液

『配制方法』在800ml水中溶解203.4g MgCl2•6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用.

→〖注意〗MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放.

19.β-巯基乙醇(BME)溶液

『配制方法』一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃.

→〖注意〗BME或含有BME的溶液不能高压处理.

20.NBT溶液

『配制方法』把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.

21.酚/氯仿溶液

『配制方法』把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L

Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l

Tris?HCl(pH7.6)液层,保存于4℃.

→〖注意〗酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服.所有操作均应在化学通风橱中进行.与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇.

22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液.

『配制方法』用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃.如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L).

→〖注意〗PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之.被PMSF污染的衣物应予丢弃.PMSF在水溶液中不稳定.

相关搜索: 实验室 配制
查看版权声明 责任编辑:Techoo-5
文章相关:
提意见或留言(需要审核后显示) 查看 进入论坛交流
表情0 表情1 表情2 表情3 表情4 表情5
表情6 表情7 表情8 表情9 表情10 表情11
请尊重网上道德,遵守中华人民共和国各项有关法律法规
 热门图片新闻
  • 黄金周后省内螃蟹价格不降反升 再等半个月左右 吃蟹性价比最高
  • 160元一公斤!南京“天价”香椿芽抢先上市
  • 番茄比鸡蛋贵!昆明市场上番茄零售价格上涨
  • 火锅里的肉丸子都是肉吗?事实不是你想像的!
  • 鸡架泥槽头肉入馅 这样的低价水饺你敢吃吗
  • 黄金周后省内螃蟹价格不降反升 再等半个月左右 吃蟹性价比最高
  • 160元一公斤!南京“天价”香椿芽抢先上市
  • 番茄比鸡蛋贵!昆明市场上番茄零售价格上涨
  • 火锅里的肉丸子都是肉吗?事实不是你想像的!
  • 鸡架泥槽头肉入馅 这样的低价水饺你敢吃吗
  • 缩略图
  • 缩略图
  • 缩略图
  • 缩略图
  • 缩略图