食品中香兰素的高效液相色谱仪（HPLC）检测方案

     香兰素(Vanillin)，又名香草醛，为一种广泛使用的可食用香料，可在香荚兰的种子中找到，也可以人工合成，有浓烈奶香气息。广泛运用在各种需要增加奶香气息的调香食品中，如蛋糕、冷饮、巧克力、糖果;还可用于香皂、牙膏、香水、橡胶、塑料、医药品。
 
     目前还没有相关报道说香兰素对人体有害。但是不可过量，据欧盟专家委员会2000年2月24日报导，大剂量可导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至损伤肝、肾等，故正商订降低允许剂量中。
 
     赛智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检验可提供食品中香兰素的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于食品类添加香兰素的测定，仅供广大用户参考。
 
    以下是食品中香兰素的液相色谱仪测定的详细检测方法。
 
1、仪器与试剂
 
1.1仪器
 
    LC-10Tvp高效液相色谱仪;
 
    Vertex色谱柱250mm×4.6mm×5μm;
 
    超声波水浴;
 
    万分之一天平;
 
    组织捣碎机;
 
    微孔滤膜：0.45μm，水相。
 
1.2试剂
 
    甲醇：色谱纯。
 
    无水乙醇。
 
    磷酸溶液：0.01mol/L
 
    香兰素标准工作液：称取一定量的香兰素用流动相溶解配置成100mg/l的溶液，逐级稀释到一定的浓度作为工作液。
 
2、测定原理
 
    样品加适量乙醇经超声波提取，经高效液相色谱仪测定，外标法定量。
 
3、色谱条件
 
    色谱柱：Vertex色谱柱250mm×4.6mm×5μm;
 
    流动相：甲醇磷酸水溶液0.01mol/L(2575);
 
    流速：1mL/min;
 
    进样量：20μL;
 
    检测波长：350nm。
 
4、试样溶液的制备
 
    样品制备：固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用;液体样品摇匀后备用。
 
   试样处理：准确称取一定量的(精确至0.01g)试样至500mL离心管中，加入20mL乙醇，混匀，经超声波浸提30min后，4000r/min离心5min，取上清液1ml，加入4ml的流动相，混匀，经0.45μm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。
 
5、结果分析
 
    在添加0.25g/kg-5.0g/kg范围内，回收率在89%-106之间，相对标准偏差小于5%。