使用操作 |
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稀释剂 Butterfield , s phosphate buffer (IDF phosphate buffer,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%蛋白胶水、蛋白胶盐水稀释液(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulifite-free letheen broth或蒸馏水.
水化 作空气取样或直接接触法取样前,首先用1mL适宜的无菌稀释液水化PetrifilmTM测试片,水化后的测试片最好静置1小时后方可使用,不用培养基完全凝固. 用letheen broth水化后PetrifilmTM霉菌、酵母菌测试片, 仅用于直接接触表面监测.
储存 水化后的PetrifilmTM菌试片装入袋内或塑料内用胶布封好避光(可用铝箔袋),于2-8℃(36-46.F )冷藏存放. 水化的PetrifilmTM Aerobic Count测试片可冷藏存放14天,其它的水化PetrifilmTM测试片可冷藏存放7天.
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空气取样法 |
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1.水平放置时,可使用一个PetriflimTM测试片荚子上粘油双面胶带, PetriflimTM测试片上下层膜结合处以荚子夹住,荚炳两端各粘一小片双面胶. |
2.避免接触到圆形培养面揭起水化的测试片上层膜且向后拉直到上侧外侧与双面胶粘附,使上层膜平放于荚子上. |
3.垂直放置作空气样检测时,可使用双面胶已取代固定荚,使测试片在空气中暴露约15分钟后移开.使上层膜与底层版板再结合成原状. |
4.按培养和计数,并可参考判读卡计算菌落数. |
直接接触法 |
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1.小心揭起已水化的测试片上层膜, 避免接触到圆形培养面,培养基将会粘附在上层膜上. 注:当揭起上层模式时,在上层膜和底层板上都粘附有培养基此时分离的培养基可做空气样计数,但不能做为直接接触表面检测计数. |
2.以圆形培养基接触的待测物表面并以手指清压上层膜辅助其培养基与接触物表面更好的接触.正像其它表面取样方法法一样,最适合的微生物实验是擦拭接触面去除残留物. |
3.除快速金黄色葡萄球菌测试片高灵敏的测试片和霉菌、酵母菌测试片外,其它所有PetriflimTM测试,均可用手或手指按压,使上层膜和底层膜结和在一起,按包装袋内说明进行培养和计数。 |
4.从接触面拿起上层膜与地层板结合成原状,按包装袋内说明进行培养和计数。并可参考判读卡计算菌落数. |
直接接触法结果 |
PetriflimTM测试片计数结果/20cm2 *细菌总数 *大肠菌群数 *大肠杆菌/大肠菌群数 *快速大肠菌群数 *肠杆菌科细菌数 PetriflimTM测试片计数结果/30cm2 *霉菌和酵母菌数 *快速金黄色葡萄球菌数
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拭子涂抹法 |
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1.从再封的塑料袋中取出3M所需数量的快速拭子,标记每个快速拭子. |
2.在取样的部位,用手握住管子,以大拇指接触近末端的球茎状物,在侧面推红色阀门成45度角,听到啪的一声响, 阀门打开, Letheen broth 流入管中和浸湿拭子. |
3.用力挤压球茎状物末端, 使Letheen broth流入管子的末端 |
4.挤扭管子使球茎状物和拭子管相连接分开. |
5.拿住拭子柄与待测物表面成一定角度,缓慢并全面涂抹待测物表面,每涂抹一次注意翻转拭子头的方向. |
6.取样后, 完整的把拭子放回拭子管中, 并及时送到实验室接种. |
7.在实验实里,充分振摇或旋涡拭子至少10秒钟,使细菌于拭子分离. |
8.在管壁上挤拧拭子头上的内容物,按通常工业用标准方法处置弃去拭子. |
9.小心的倾注管中的全部内容物到3M PetriflimTM测试片上. |
10.按包装内说明培养和计数并可参考计算菌落数. |
可选则的拭子(涂抹)方法 |
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1. 分装适量的的冲洗液到带有螺旋帽的小试管中,高压灭菌后约为5Ml, 浸湿拭子头部,紧贴管内壁转动,挤压出多余的溶液. |
2. 拿住拭子柄与待测物表面成30度角, ,缓慢并全面涂抹待测物表面三次, 每涂抹一次注意翻转拭子头的方向. |
3. 涂抹后折断拭子头放入冲洗液试管中盖上帽, 充分振摇带拭子头的试管10秒钟,取出1mL混悬液接种到PetriflimTM测试片上.
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