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尿素琼脂培养基基础

时间:2016/3/30 14:17:00 来源:网友

尿素琼脂培养基基础         (Urea Agar Base)

用    途:

用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4-2010,《中华人民共和国药典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO标准)。

原    理:

蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾是缓冲剂;具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素,产生大量的氨,使培养呈碱性,酚红指示剂在pH6.8时呈黄色,pH8.1呈粉红色;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升):

蛋白胨 1g

氯化钠 5g

葡萄糖 1g

磷酸二氢钾 2g

酚红 0.012g

琼脂 12g

最终pH7.2±0.2

使用方法:

1、 称取本品21g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,待冷却至50—55℃,每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的最终浓度为2%。分装无菌试管,制成斜面。

2、 挑取待检菌的新鲜纯培养物,浓密地涂布在尿素琼脂斜面上,置36±1℃培养24h。

3、 于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应,颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。

质量控制:

质控菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下 :

菌    名          菌    号      生长状况         培养特征

普通变形杆菌        HK7131         良好         培养基变红色

大肠埃希氏菌       ATCC25922       良好         培养基不变色

贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格:250g

参考文献:

1.GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法,培养基和试剂

3.SN0170-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法

4.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

5.GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

6.GB 13091-91 中华人民共和国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法

7. 《中华人民共和国药典》2010年版,附录XI J 微生物限度检查。

8.ISO 6579:2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.



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