6.6 油性维生素A脂肪酸酯
Vitamin A Fatty Acid Ester in oil
本品是从水产动物的新鲜肝脏、幽门垂等得到的脂肪油的维生素A浓缩物的脂肪酸酯,或将维生素A脂肪酸酯溶在食用植物油中,1g含300mg以上维生素A,含标记量的90~120%维生素A①,维生素A300mg相当100万I.U.②。
1.性状
本品为无色~带淡黄色的油脂状,稍有特异臭气③。
2.鉴定试验
(1)将本品50mg溶于1mL氯仿中,调制成含10I.U.维生素A,取1mL,加三氯化铵试液5mL,呈现蓝色,并立即消退④。
(2)将本品50mg溶于维生素A测定,用异丙醇中调溶液1mL约含10I.U.,此液的波长327±1nm处有最大吸收峰⑤.
3.纯度试验
(1)游离酸 取本品2g,按香料的常规试验法的酸值测定法进行。但0.1mol/L氢氧化钾溶液的消耗量应在0.7mL以下⑥。
(2)乙醇型维生素A 把本品100mg溶在石油醚中,调成1mL含100~200 I.U.,做检液。然后在石油醚中把悬浊的氧化铝做成高约5cm的氧化铝层。通常将氧化铝层浸在石油醚中制成吸附管。在氧化铝层上部挂一小片脱脂棉,其中加入石油醚10mL,石油醚以1min落下30滴的速度缓慢吸入石油醚的液面在氧化铝层上面约1cm时,在吸附管内加5~10mL检液。检液的液面在氧化铝层上面约1cm时,用含5%乙醚的石油醚,以同样速度把酯型维生素A流出后,用同样方法用含有50%乙醚的石油醚收集流出的醇型维生素A。用波长350nm的紫外线箴期照射观察酯型维生素A及醇型维生素A的吸附层中的移动及流出。如吸附层裂开或产生气体,重新操作。本操作在常温下进行。得到的醇型维生素A溶液,通氮气或二氧化碳在约70℃水浴 蒸发除去石油醚,把残留物立即溶在异丙醇中,调整1mL含10国际单位后,在波长310nm,325nm及334nm处测定吸光度,根据下式求出醇型维生素A的含量,其量应在10%以下⑦。
式中 a——前面操作得到的吸光度,从定量法得的醇型维生素A的单位:
b——从定量法得到的总维生素A的单位。在这里石油醚,乙醚,氧化铝及异丙醇都是用于测定维A的。
4.定量法
精确称取本品约0.5g,放在100mL的三角烧瓶中,加乙醇30mL及50%氢氧化钾溶液3mL,水浴加热30min。在流水中冷却后,用水30mL移到分液漏斗中,用10mL水洗烧瓶,洗液加到分液漏斗中。再用乙醚50mL洗烧瓶,把乙醚洗液加到分液漏斗中。再用乙醚50mL洗烧瓶,把乙醚洗液加到分液漏斗中充分混合振荡后静置。然后,把水层移到另外分液漏斗中,每次用乙醚50mL洗二次,把乙醚抽提液合在最初的乙醚抽提液中,把它用50mL水洗,反复操作直到水层加酚酞试液不显色为止。静置片刻,完全除去水层以后,把乙醚抽提液移到250mL的褐色茄形烧瓶中,每次用10mL乙醚抽提液通入氮气或二氧化碳,在约40℃水浴上把乙醚蒸发除去后,残留物立刻溶在异丙醇中,调整其1mL约含10I.U.作为检液。检液在波长310nm、325nm及334nm处测定吸光度,根据下式求出本品1g中的维生素A的含量。所用的乙醚及异丙醇是作为维A测定用。
本品1g中的维生素A(mg)= 325nm×0549⑧。
保存标准:放到遮光密封容器中用氮气置换空气保存存⑨。
注 解
①JPIX中醋酸松香油、棕榈酸松香油是95~105%。
②维生素A的I.U.表示生物学的效力,所以国际上规定0.344μg all-trans-维生素A1醋酸酯定为1I.U.,1I.U.相当all-trans-维生素A1乙醇0.3μg、all-trans-β-胡萝卜素0.6μg。
③一般色调浅的是淡黄色的,通常是油状,在冬天或低温贮藏时有固形物析出。有由维生素A和食用植物油带来的特殊臭气,无不快感。不快感的臭气主要是由于氧化、变质、使维生素A破坏并妨害了食品的风味,不适于添加在食品中。
④适用于Car-pricl反应的呈色反应。维生素A与三氯化锑作用呈现特有的蓝色,显色的λmax是620nm。易呈色,但不稳定,容易退色。聚烯类也有此反应,脱水,不脱水、脱氢维生素A,β-胡萝卜素等胡萝卜素类物质也表示类似的呈色。检液中维生素A浓度有规定,如果与规定浓度差距太大给显色鉴定反应带来困难。
⑤本品是油性维生素A脂肪酸酯类的混合物,所以规定λmax为327±1nm。吸光度醋酸维生素A1λmax:326nm, :1,550(乙醇)1,535(异内醇);棕榈酸维生素A1λmax:325~328nm, :975(乙醇);维生素A1醇λmax:325nm :1,835(乙醇,异丙醇,)。氧化变质或维生素E等存在对λmax有影响。
⑥将酸值规定为1.96以下。酸值高主要是由食用植物油带来的。所以希望得到品质好的。
⑦因制造时酯化不充分引起的,所以定量法是利用铝柱层色谱法。
⑧本法用重量求出维生素A的量,如用1,830代替式中的换算系数0.549,用国际单位数求出。
⑨本品与维生素A及溶剂的食用植物油都易氧化,在空气中自动氧化,遇光易分解变质,所以规定了保存标准。