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甲苯胺蓝-DNA琼脂

时间:2016/3/28 15:26:00 来源:网友

甲苯胺蓝-DNA琼脂(Toluidine Blue-DNA Agar)

用     途:

用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶的试验。    (SN 0172-92)。

原    理:

具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA),使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链,使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂;琼脂为培养基的凝固剂。

配方(每升):

脱氧核糖核酸(DNA) 0.3g

氯化钙 0.0011g

氯化钠 10g

甲苯胺蓝 0.083g

三羟甲基氨基甲烷 6.1g

琼脂 10g

最终pH  9.0±0.2

使用方法:

1. 称取本品26.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌15min(即用可不需灭菌),备用。

2. 载玻片的制备:取3mL甲苯胺蓝-DNA琼脂平铺于在载波片上制成标本,待琼脂凝固后,在琼脂上打成直径2mm的小洞(每个载玻片10-12个),抽出小洞中的琼脂块。

3. 从Baird-parker平板挑一个可疑单菌落接种普通肉汤培养基中,36±1℃培养20h~24h后,经过100℃沸水煮15min,取0.01mL接种所制备的载玻片上小洞,于35℃培养4h后,观察结果。

质量控制:

质控菌株接种后,于35℃培养4h结果如下:

菌    名 菌    号 培养特征

金黄色葡萄球菌 ATCC6538 粉红色圈

表皮葡萄球菌 CMCC(B)26069 无粉红色圈

贮    存:2~8℃避光贮存

贮 存 期:三年

规    格:100g

参考文献:

1.SN0172-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法



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