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特殊染色法

时间:2015/3/25 14:47:00 来源:网友

(1)鞭毛染色(改良Ryu法):①玻片的处理  将新载玻片浸泡在95%乙醇中。临用时取出,以干净纱布擦干。②在玻片上滴蒸馏水1滴。③挑取培养物少许,轻触蒸馏水滴顶部,仅允许极少量细菌进入水滴,不可搅动,以免鞭毛脱落。④置35℃孵箱自然干燥,不能用火焰固定,滴加鞭毛染液染1~2 min轻轻水洗。⑤干后显微镜镜检观察结果  鞭毛和菌体呈紫色。

(2)异染颗粒染色(阿尔培托法):①细菌涂片经火焰固定,加甲液染色3~5min。水洗。②滴加乙液,染1min。水洗。③干后显微镜镜检观察结果  菌体呈绿色,异染颗粒呈蓝黑色,用于白喉棒状杆菌染色。

(3)荚膜染色:①奥尔特荚膜染色法:将已固定的细菌涂片滴加3%沙黄染液,用火焰加温染色,持续3min,冷却后水洗,待干镜检。结果:菌体呈褐色,荚膜呈黄色,此法主要用于碳疽芽胞杆菌。②Hiss氏硫酸铜法:染液:第一液为结晶紫乙醇饱和液5ml加蒸馏水95ml 的混合液;第二液为20%硫酸铜水溶液。方法:细菌涂片自然干燥,乙醇固定。滴加第一液,微加热染1min。再用第二液将涂片上的染液洗去,勿再水洗,倾去硫酸铜液,以吸水纸吸干镜检。结果:菌体及背景呈紫色,荚膜呈鲜蓝色或不着色。

(4)芽胞染色:染液:第一液为萋-纳氏石炭酸复红液,第二液为95%乙醇,第三液为碱性美蓝液。方法:将已固定的细菌涂片滴加第一液,微加热染5min,冷却后水洗。用第二液脱色2min,水洗。加第三液复染1min,水洗,待干镜检。结果:菌体呈蓝色,芽胞呈红色。




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