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环境样品中基因组DNA抽提试剂盒
一、抽提原理
基于Silica材料的固相提取技术的主要原理是：样本在高离溶液中裂解释放核酸，然后结合到Silica材料上，经过清洗去除土壤样本中的杂质，然后在低离子强度下核酸从Silica材料上解离释放到洗脱液中，适用于从土壤、动物粪便等环境样品及从其它可以粉碎的固态样品中抽提包括基因组在内的DNA, 也可以从液体样品中抽提DNA。
二、试剂盒组成(50次，常温保存)
Solution I10ml
裂解液（LB）20ml
Solution III6ml
清洗液（WB）16ml(第一次使用时，先加入44ml的无水乙醇)
洗脱液（EB）5ml
吸附柱50个
离心管50个

三、操作程序
1、样品准备：
I: 如果样品为固体，用合适的工具将样品磨成粉末，取100mg用200ul Solution I将样品浸泡、悬浮, 使样品软化分散开。
II: 动物粪便或土壤可以直接取100mg，用200ul Solution I将样品悬浮起来.
III:液体材料如果体积小于200ul,可以直接执行步骤2；液体材料如果体积大于200ul，需要采用合适的方式浓缩到200ul以下,如离心收集液体中固体或离心浓缩等，然后执行步骤2。
2、加入400ul LB，盖上离心管盖，在旋涡振荡器上高速剧烈振荡，10-30分钟或更长的时间。
3、用台式离心机，12,000转/分，室温离心5分钟。
4、将上清完全转移到无菌1.5ml离心管中，加入120ul Solution III，盖上离心管盖，上下颠倒混匀。将溶液用1ml TIP全部转移到柱内，柱子放入2ml离心管中，不盖离心管盖，室温放置2分钟以上。
5、盖上离心管盖，12,000转/分，室温离心1分钟。
6、将取下柱，弃去离心管中的废液。将柱子放回同一根离心管中，加入600μl WB, 10,000转/分，室温离心1分钟。
7、重复步骤6一次。
8、取下柱，弃去离心管中的全部废液。将柱子放回同一根离心管中，10,000转/分，室温离心2分钟，以除去残留的Wash Solution。
9、洗脱：在柱子中央加入100μl EB, 将柱子放入新的干净1.5 ml离心管中，室温放置2分钟。12,000转/分，室温离心1分钟。收集管中的液体即为基因组DNA。根据用途，样品可以4°C或-20°C保存。注意：为提高洗脱效率，可以将EB预热到37-55°C。如果样品中基因组DNA含量很低，用30μl EB洗脱可以提高洗脱液的样品浓度，但产率有所下降。重复该洗脱步骤一次，可以提高产率20%左右。
四、注意事项
• 样本成分较为复杂时， WB可重复清洗一次。
• 样本中细胞或者病毒粒子浓度较低时，可减少EB的体积，如：30ul，但必须保证加到膜的中央，并将膜浸润。
• 本试剂盒适用于血清或血浆中微生物核酸的提取，也可用于全血核酸的提取。
说明书下载价格：1000.00元/50次

信息编号：B0273807 更新时间：2008年11月7日

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上海闪晶分子生物科技有限公司

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